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泛素化修饰蛋白组学
泛素化修饰是一种重要的翻译后修饰,泛素蛋白酶体系统介导了真核生物 80%~85% 的蛋白质降解。除此之外,泛素化修饰还可以影响蛋白质的定位与活性,参与细胞周期、转录调节、细胞增殖、分化、信号传递、细胞凋亡、损伤修复、炎症免疫等几乎一切生命活动的调控。泛素化修饰蛋白组学利用对泛素化赖氨酸(K-GG)具有高亲和力的基序抗体,特异性富集复杂样本中的泛素化肽段,结合LC-MS/MS高分辨质谱蛋白质定量方法,实现大规模泛素化蛋白质的定性定量分析。
糖基化修饰蛋白质组学
糖基化修饰是一种常见的蛋白翻译后修饰,糖基化在生物体内起着重要的作用。糖基化修饰不仅影响着蛋白质的空间构象、生物活性,在分子识别、信号转导等生物过程中也发挥着重要的作用。糖蛋白根据其糖链结构及糖基化位点主要有 N- 糖蛋白与 O- 糖蛋白两大类。N-糖基化(N-linked glycosylation)是糖链通过与蛋白质的天冬酰胺的自由NH2基共价连接形成的,O-糖基化(O-linked glycosylation)是糖链与蛋白质的丝氨酸或苏氨酸的自由OH基共价连接, O-糖基化位点没有保守序列,糖链也没有固定的核心结构,组成既可是一个单糖,也可以是巨大的磺酸化多糖,因此与N-糖基化相比,O-糖基化分析会更加复杂。目前常用的糖蛋白分离富集技术有以下五种:凝集素亲和技术、肼化学富集法、硼酸法、免疫法, 亲水相互作用色谱法(HILIC)。
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